Bacteriën kweken
1. De beginstoffen
De lichtgevende bacterie is kieskeurig voor zijn leefomgeving,
daardoor moet je de juiste stoffen bij elkaar zoeken. Helaas voor ons
was de voorraadkast met stoffen vele malen groter dan bij ons op school.
Je moest dus echt naar een stof zoeken via een nummer die bij het stof hoort.
2. maken van vloeibaar medium
Als je alle stoffen eenmaal hebt verzameld moet je nog de juiste hoeveelheden
afwegen. Na alle stoffen bij elkaar te hebben gedaan heb je een soort
bouillon. Met apparatuur zoals de pH-meter op de foto kun je waarden meten
die belangrijk zijn voor een perfecte leefomgeving voor lichtgevende
bacteriën. Met een pH meter kun je de pH waarde meten voor de bacteriën.
Ook moet je schudden, daarvoor kun je een schudplateau gebruiken.
3. steriliseren
Je moet al het vloeibare medium steriliseren. Dat kan doormiddel van
een hogedrukpan. Zo voorkom je bijvoorbeeld dat andere bacterie zich
nestelen in je medium. De erlenmeyers worden dan ook doormiddel van
watten en aluminiumfolie steriel afgesloten. Als je het medium aanent,
dan haal je de wattenprop eraf. Na aanenten flambeer je de hals van
de erlenmeyer en sluit hem af met de wattenprop.
4. maken van vast medium
Je kunt natuurlijk ook een vastmedium gebruiken voor het
kweken van bacteriën. Daarvoor giet je wat van je vloeibare medium met
agar in een aantal petrischaaltjes. Agar is een soort van gel.
Ook deze petrischaaltjes moeten steriel zijn.
5. kweken kan beginnen
Voor vloeibaar medium hoef je alleen de bacteriën erbij te doen en
de bacteriën beginnen zich al aardig te delen. Bij een vast medium moet
je een aantal kolonies van lichtgevende bacteriën met een entnaald op
het petrischaaltje met medium strijken. Maar voorafgaand moet je eerst
de nodige maatregelen nemen. Je moet de entnaald steriliseren. Dan haal
je een entnaald even door een blauwe geruisloze vlam. Na een dag zie je
dan dat er zich kleine kolonies lichtgevende bacteriën hebben ontwikkeld.
Hier zie je een entnaald
Hier zie je een kolf met bacteriecultuur
6. Resultaat van agarplaten
In het licht
In het donker, de namen lichten op
Overzicht van de platen in het donker
Na een dag is de concentratie lichtgevende bacteriën zo hoog geworden,
dat je zichtbaar licht ziet en dat kan leuke effecten opleveren zoals je
aan de foto’s kunt zien. We hebben met de entnaald onze namen geschreven.
Impressie van het gebruikte materiaal
1. Eppendorfcentrifuge
Na het kweken van de bacteriën kun je gaan experimenteren.
Voordat je experimenteert ga je de bacteriën oogsten en wassen door
te centrifugeren. De centrifuge kan tot 13000 toeren per minuut draaien.
In het midden zie je de rotor waarin de eppendorfvaatjes passen.
2. Lichtmeter en incubator
Om het aantal relatieve lichteenheden te meten gebruik je het linker apparaat.
De meetkamer bevindt zich onder het zwarte gedeelte. Aan de voorzijde zie je
de display waar je de gemeten waarden kunt aflezen. De monsters die je
analyseert in de incubator, rechts op de foto, op 15 graden Celsius gehouden.
Je ziet de flesjes met blauwe dop waarin de bacteriën bewaard worden.
Ervoor zie je putjes waarin de cuvetten passen met de monsters.
3. Variabele pipet
Met deze variabele pipet kun je nauwkeurig de juiste hoeveelheid vloeistof
bij elkaar doen. Er waren drie soorten variabele pippetten, namelijk voor
hoeveelheden tot 1 mL, tot 100 µL en tot 20 µL. In de buis met de blauwe dop
zitten de gewassen bacteriën die klaar zijn voor gebruik in de test.in het rekje
staan de cuvetjes met de verdunningsreeks die klaar zijn voor meting.
4. Flesjes met kunstmatig zeewater
Op de rechter foto zie je de oplossingen die gebruikt zijn als
vervangend zeewatervoor het experiment. De groot uitgevallen stopwatch
dient om de exacte incubatietijd te meten.
5. Overzicht
Hieronder zie je een overzicht van de werktafel waar we bijna
9 uur hebben doorgebracht.
